孫全友 徐彬 王琳燚 藺萍 白杰盛衛(wèi)東鄭新社 李紹鈺*
(河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,鄭州 450002)
摘要:本試驗(yàn)旨在研究飼糧中添加抗菌肽和姜黃素對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能、抗氧化功能及腸道微生物的影響。選用1日齡AA肉仔雞360只,隨機(jī)分為5組(每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)12只雞)。對(duì)照組為基礎(chǔ)飼糧組,試驗(yàn)組分別為添加
關(guān)鍵詞:肉雞;抗菌肽;姜黃素;生產(chǎn)性能;抗氧化功能;腸道微生物
隨著整個(gè)社會(huì)對(duì)食品安全問(wèn)題的日趨關(guān)注,抗生素的禁用是畜牧業(yè)發(fā)展的必然趨勢(shì),因此,開(kāi)發(fā)新型的綠色安全無(wú)公害飼料添加劑來(lái)替代抗生素一直是畜牧業(yè)生產(chǎn)中的研究熱點(diǎn)。
姜黃素(curcumin)是從姜科姜黃屬植物的根莖中提取的一種多酚類化合物,起初是作為一種天然色素被用到食品工業(yè)中,隨著研究的深入還發(fā)現(xiàn)姜黃素還具有廣泛的藥理作用,如抗炎、抗癌、抗氧化等[1,2]。姜黃素獨(dú)特的生理功能使其有可能成為一種新型綠色的抗生素替代品,在動(dòng)物生產(chǎn)上的研究也日益受到重視。Sa等[3]報(bào)道姜黃素對(duì)多種疾病都有預(yù)防和治療作用;Zingg[4]等報(bào)道姜黃素抑制自由基的產(chǎn)生是通過(guò)抑制活性氧產(chǎn)生的酶,如NADPH氧化酶(NOX),脂氧合酶/環(huán)氧化酶,黃嘌呤脫氫酶/氧化酶和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的。孫全友等[5]報(bào)道姜黃素在肉雞生產(chǎn)中與其它一些微生態(tài)制劑配合使用比單一使用能取得更好的效果。
自從1980年瑞典科學(xué)家Boman等從惜古比天蠶蛹的血淋巴中分離出第一個(gè)昆蟲(chóng)抗菌肽天蠶素(Cecropin)后,各國(guó)的研究人員陸續(xù)從病毒、細(xì)菌到植物、昆蟲(chóng)、軟體動(dòng)物、甲殼動(dòng)物、兩棲動(dòng)物、魚(yú)類、鳥(niǎo)類和哺乳動(dòng)物等生物中分離出類似的成分??咕?/FONT>(antimicrobial peptides)具有廣譜殺菌作用、相對(duì)分子量較小、熱穩(wěn)定、水溶性好等優(yōu)點(diǎn), 更為重要的是抗菌肽對(duì)真核細(xì)胞幾乎沒(méi)有作用,僅作用于原核細(xì)胞和發(fā)生病變的真核細(xì)胞??咕氖撬拗飨忍煨悦庖叻烙到y(tǒng)產(chǎn)生的一類抵抗外界病原體感染的生物活性小肽,在病原菌對(duì)抗生素產(chǎn)生的耐藥性日益增加的嚴(yán)峻形勢(shì)下,抗菌肽作為新型的抗生素替代品已成為各國(guó)研究人員研究的熱點(diǎn)[6-9]。杜淑環(huán)等[10]報(bào)道,抗菌肽是生物體經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生的具有抗菌活性的一類小分子多肽,具有抗菌譜廣、抗菌活性高、不易產(chǎn)生耐藥性、不破壞生物體細(xì)胞、無(wú)免疫原性等特點(diǎn)。Xiong等[11]研究表明,抗菌肽與抗生素聯(lián)合使用可以提高抗生素的治療效果, 在很大程度上降低抗生素的用量。
本試驗(yàn)擬通過(guò)在肉仔雞飼糧中添加姜黃素和抗菌肽,研究姜黃素和抗菌肽單獨(dú)或合并使用時(shí)對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能、抗氧化功能及腸道微生物的影響。探討姜黃素和抗菌肽之間是否存在互作,為其進(jìn)一步的推廣與應(yīng)用提供理論依據(jù)。
1 材料和方法
1.1 試驗(yàn)材料及來(lái)源
試驗(yàn)所用抗菌肽為市售天蠶素抗菌肽,主要成分為枯草芽孢桿菌(2.5×107CFU/g);市售百維素,主要成分為姜黃素,含量為10%;抗生素為速大肥,主要成分為維吉尼霉素,含量為50%。
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物、分組及飼養(yǎng)管理
試驗(yàn)選取1日齡AA肉仔雞360只,隨機(jī)分成5個(gè)處理,每個(gè)處理6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)12只雞,各處理體重?zé)o顯著性差異(P>0.05)。分別為
基礎(chǔ)日糧組(對(duì)照組) 、
基礎(chǔ)日糧+
基礎(chǔ)日糧+
基礎(chǔ)日糧+
基礎(chǔ)日糧+
飼養(yǎng)試驗(yàn)在河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所肉雞試驗(yàn)基地進(jìn)行,采用常規(guī)籠養(yǎng),試驗(yàn)期42 d,按AA肉仔雞飼養(yǎng)管理操作章程進(jìn)行。
1.3 試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平
供試雞日糧以玉米-豆粕型日糧為基礎(chǔ)日糧,參照中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)肉仔雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T33—2004)營(yíng)養(yǎng)需要配制。配方及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) %
項(xiàng)目 Items |
含量 |
Contents |
1~21日齡 1 to 21 days of age |
22~42日齡 22 to 42 days of age | |
原料 Ingredients 玉米 Corn 豆粕 Soybean meal 豆油 Soybean oil 石粉 Limestone 磷酸氫鈣 CaHPO4 蛋氨酸 Methionine 食鹽 NaCl 預(yù)混料 Premix1) 氯化膽堿 Cholione chloride 合計(jì) Total 營(yíng)養(yǎng)水平 Nutrient levels2) 代謝能 Metabolizable energy(MJ/kg) 粗蛋白質(zhì) Crude protein 鈣 Calcium 有效磷 Available phosphorus 蛋氨酸Met |
60.00 34.30 2.00 1.45 1.33 0.25 0.35 0.22 0.10 100 12.54 21.50 1.00 0.45 0.50 |
62.00 30.05 4.00 1.40 1.28 0.15 0.35 0.22 0.10 100 12.96 20.00 0.90 0.40 0.40 |
1)預(yù)混料為每千克飼糧提供The premix provided the following per kg of diets:VA 8 000 IU,VB1 4.2 mg,VB2 4 mg,VB6 4.5 mg,VB12 0.02 mg,VD3 3 000 IU,VE 20 IU,VK3 2 mg,生物素 biotin 0.15 mg,葉酸 folic acid 1.0 mg,D-泛酸 D-pantothenic acid 11 mg,煙酸 nicotinic acid 10 mg,抗氧化劑antioxidant 100 mg,Cu (as copper sulfate) 10 mg,Fe (as ferrous sulfate) 80 mg,Mn (as manganese sulfate) 80 mg,Zn (as zinc sulfate) 75 mg,I (as potassium iodide) 0.40 mg,Se (as sodium selenite) 0.30 mg。
2)營(yíng)養(yǎng)水平為計(jì)算值。The nutrient levels were calculated values.
1.4 測(cè)定指標(biāo)及測(cè)定方法
試驗(yàn)雞進(jìn)雞舍時(shí),稱取其初始體重,在42日齡進(jìn)行空腹稱量各重復(fù)雞體重和各重復(fù)飼料消耗量,統(tǒng)計(jì)平均日增重、平均日增重、料重比和末重?cái)?shù)據(jù)。
血清中丙二醛(MDA)、總超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)值均采用試劑盒測(cè)定,采用UV-1800紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定。
1.4.3 腸道微生物指標(biāo)測(cè)定
將各段腸道的內(nèi)容物混勻用化學(xué)抽提方法提取腸道微生物總DNA,根據(jù)GenBank中的大腸桿菌、沙門氏菌、乳酸桿菌和雙歧桿菌的16sRNA序列,設(shè)計(jì)大腸桿菌、沙門氏菌、乳酸桿菌和雙歧桿菌的通用引物。制作細(xì)菌DNA的標(biāo)準(zhǔn)品,做出標(biāo)準(zhǔn)曲線,采用熒光定量PCR定量主要菌群的濃度,然后算出其中菌群在所有主要菌群中的比例,進(jìn)行方差分析。
1.5 數(shù)據(jù)處理
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2003和SPSS 13.0軟件的one-way ANOVA、Duncan 氏方法進(jìn)行多重比較,Univariate 進(jìn)行析因分析,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(M±SD)表示。
2 結(jié)果與分析
2.1 抗菌肽和姜黃素對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響
日糧中添加姜黃素和抗菌肽對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能的影響見(jiàn)表2。由表2可以看出,在平均日采食量方面,姜黃素+抗菌肽組的平均日采食量極顯著地高于其余四組(P<0.01),抗菌肽組和姜黃素的平均日采食量顯著高于抗生素組(P<0.05),但與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異(P>0.05);析因分析表明,抗菌肽和姜黃素對(duì)提高平均日采食量水平在接近10%的顯著水平體現(xiàn)出交互效應(yīng)( P=0.097) 。
在平均日增重方面,姜黃素+抗菌肽組的平均日增重極顯著地高于其余四組(P<0.01),抗生素組、抗菌肽組和姜黃素組的平均日增重極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),姜黃素組的平均日增重顯著高于抗生素組(P<0.05),抗生素組和抗菌肽組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);析因分析表明,抗菌肽和姜黃素之間無(wú)互作效應(yīng)。
在料重比方面,抗生素組、抗菌肽組和姜黃素組的料肉比極顯著地低于對(duì)照組(P<0.01),姜黃素+抗菌肽組的料肉比顯著地低于對(duì)照組(P<0.05),各試驗(yàn)組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);析因分析表明,抗菌肽和姜黃素對(duì)料重比水平具有極顯著的交互效應(yīng)( P<0.01)。
42日齡體重方面,姜黃素+抗菌肽組的42日齡體重極顯著地高于其余四組(P<0.01),抗生素組、抗菌肽組和姜黃素組的42日齡體重極顯著地高于對(duì)照組(P<0.01),姜黃素組的42日齡體重顯著地高于抗生素組(P<0.05),抗生素組和抗菌肽組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);析因分析表明,抗菌肽和姜黃素之間無(wú)互作效應(yīng)。
表2 姜黃素和抗菌肽對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響
Table 2 Effects of curcumin and antimicrobial peptide on performance of broilers
處理 Treatments |
日采食量 ADFI/g |
日增重 ADG/g |
料重比F/G |
42d體重BW/kg |
對(duì)照組 Control group |
96.50±2.74Aab |
51.28±0.98Aa |
1.88±0.02Bb |
2.20±0.04Aa |
抗生素組 Antibiotic group |
94.94±2.49Aa |
53.84±1.07Bb |
1.76±0.03Aa |
2.31±0.04Bb |
抗菌肽組 Antimicrobial peptide group |
98.43±1.97Ab |
55.36±1.42Bbc |
1.77±0.04Aa |
2.37±0.06Bbc |
姜黃素組 Curcumin group |
99.49±3.67Ab |
55.91±1.54Bc |
1.78±0.06Aa |
2.40±0.06Bc |
姜黃素+抗菌肽組 Curcumin + Antimicrobial peptide group |
105.34±2.40Bc |
58.30±2.02Cd |
1.80±0.06ABa |
2.50±0.09Cd |
析因分析值Factorial analysis |
P |
P |
P |
P |
抗菌肽Antimicrobial peptide |
0.003 |
0.000 |
0.073 |
0.000 |
姜黃素Curcumin |
0.000 |
0.000 |
0.086 |
0.000 |
姜黃素*抗菌肽 Curcumin * Antimicrobial peptide |
0.097 |
0.191 |
0.003 |
0.188 |
同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)相同字母表示差異不顯著(P>0.05),不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05),不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。
In the same row, values with the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01).The same as below.
2.2抗菌肽和姜黃素對(duì)肉仔雞抗氧化功能的影響
飼糧中添加抗菌肽和姜黃素對(duì)肉仔雞抗氧化性能的影響見(jiàn)表3。在21日齡時(shí),抗菌肽+姜黃素組的血清丙二醛濃度極顯著低于對(duì)照組、抗生素組和抗菌肽組(P<0.01),姜黃組的血清丙二醛濃度極顯著低于對(duì)照組(P<0.01),對(duì)照組、抗生素組和抗菌肽組三組間無(wú)顯著性差異(P>0.05);姜黃素組的血清總超氧化物歧化酶的含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),顯著高于抗菌肽組(P<0.05),抗菌肽+姜黃素組的血清總超氧化物歧化酶的含量顯著高于對(duì)照組和抗菌肽組(P<0.05),對(duì)照組、抗生素組和抗菌肽組三組間無(wú)顯著性差異(P>0.05);抗菌肽+姜黃素組的血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含量極顯著高于其它四組(P<0.01),抗菌肽組和姜黃素組的血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含量極顯著高于對(duì)照組和抗生素(P<0.01),二者之間無(wú)顯著性差異(P>0.05),抗生素的血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。
在42日齡時(shí),抗生素組、抗菌肽組、姜黃素組和抗菌肽+姜黃素組的血清丙二醛濃度均極顯著低于對(duì)照組(P<0.01),姜黃組的血清丙二醛濃度顯著低于抗生素組和抗菌肽組(P<0.05),與抗菌肽+姜黃素組無(wú)顯著性差異(P>0.05);抗生素組、抗菌肽組、姜黃素組和抗菌肽+姜黃素組的血清總超氧化物歧化酶的含量均極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),姜黃素組的血清總超氧化物歧化酶的含量極顯著高于抗生素組(P<0.01),顯著高于抗菌肽(P<0.05),抗生素組和抗菌肽組無(wú)顯著性差異(P>0.05);抗菌肽+姜黃素組的血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含量極顯著高于其它四組(P<0.01),抗菌肽組和姜黃素組的血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),與抗生素組無(wú)顯著性差異(P>0.05),抗生素的血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。
表3 抗菌肽和姜黃素對(duì)肉仔雞抗氧化性能的影響
Table 3 Effects of antimicrobial peptide and curcumin on antioxidant performance of broilers
項(xiàng)目 |
時(shí)間 |
對(duì)照組 |
抗生素組 |
抗菌肽組 |
姜黃素組 |
抗菌肽+姜黃素組 |
Items |
Time |
Control group |
Antibiotic group |
Antimicrobial peptide group |
Curcumin group |
Antimicrobial peptide+ curcumin group |
丙二醛(nmol/ml)MDA |
21d |
2.54±0.06Cc |
2.33±0.23BCbc |
2.46±0.09BCc |
2.06±0.42ABab |
1.78±0.27Aa |
42d |
3.60±0.27Bc |
2.58±0.43Ab |
2.54±0.33Ab |
2.14±0.07Aa |
2.40±0.21Aab | |
總超氧化物歧化酶(U/ml) SOD |
21d |
111.41±4.93Aa |
119.47±9.90ABab |
115.78±3.13ABa |
127.31±9.50Bb |
125.58±4.82ABb |
42d |
101.09±8.67Aa |
118.48±8.92Bb |
120.25±8.11BCb |
132.02±4.66Cc |
126.60±4.93BCbc | |
谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(U/ml)GSH-PX |
21d |
2680.37±181.91Aa |
2932.71±197.71Ab |
3499.47±150.47Bc |
3536.17±68.87Bc |
4046.81±208.48Cd |
42d |
2738.30±122.91Aa |
3348.39±110.68ABb |
3370.64±87.77Bb |
3450.00±229.40Bb |
3716.13±167.53Cc |
2.3抗菌肽和姜黃素對(duì)肉仔雞腸道微生物的影響
2.3.1腸道細(xì)菌部分總DNA檢測(cè)
盲腸細(xì)菌部分總DNA檢測(cè)
2.3.2細(xì)菌及標(biāo)準(zhǔn)品的擴(kuò)增曲線、溶解曲線
四種細(xì)菌部分?jǐn)U增曲線(帶標(biāo)準(zhǔn)品)
四種細(xì)菌部分標(biāo)準(zhǔn)曲線
四種細(xì)菌部分?jǐn)U增溶解曲線
2.3.3抗菌肽和姜黃素對(duì)肉仔雞腸道微生物的影響
飼糧中添加抗菌肽和姜黃素對(duì)肉仔雞盲腸微生物的影響見(jiàn)表4。21日齡時(shí),四個(gè)試驗(yàn)組的盲腸中乳酸桿菌含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),抗菌肽+姜黃素組的盲腸中乳酸桿菌含量顯著高于抗生素組、抗菌肽組和姜黃素組(P<0.05),抗生素組、抗菌肽組和姜黃素組三組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);四個(gè)試驗(yàn)組的盲腸中雙歧桿菌含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),四組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);四個(gè)試驗(yàn)組的盲腸中大腸桿菌含量極顯著低于對(duì)照組(P<0.01),抗菌肽+姜黃素組的盲腸中大腸桿菌含量顯著低于抗生素組和抗菌肽組(P<0.05),抗生素組和抗菌肽組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);四個(gè)試驗(yàn)組的盲腸中沙門氏菌含量極顯著低于對(duì)照組(P<0.01),四組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
42日齡時(shí),四個(gè)試驗(yàn)組的盲腸中乳酸桿菌含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),抗菌肽+姜黃素組的盲腸中乳酸桿菌含量極顯著高于抗生素組、抗菌肽組(P<0.05),與姜黃素組無(wú)顯著性差異(P>0.05),姜黃素組的盲腸中乳酸桿菌含量顯著高于抗生素組和抗菌肽組(P<0.05),抗生素組和抗菌肽組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);四個(gè)試驗(yàn)組的盲腸中雙歧桿菌含量極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),抗生素組的盲腸中雙歧桿菌含量極顯著高于姜黃組(P<0.01),與抗菌肽組和抗菌肽+姜黃素組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);四個(gè)試驗(yàn)組的盲腸中大腸桿菌含量極顯著低于對(duì)照組(P<0.01),抗菌肽+姜黃素組的盲腸中大腸桿菌含量顯著低于抗菌肽組(P<0.05),與抗生素組和姜黃素組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05);四個(gè)試驗(yàn)組的盲腸中沙門氏菌含量極顯著低于對(duì)照組(P<0.01),抗菌肽+姜黃素組的盲腸中沙門氏菌含量極顯著低于抗生素組、抗菌肽組和姜黃素組(P<0.01),抗生素組、抗菌肽組和姜黃素組三組間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
表4 抗菌肽和姜黃素對(duì)盲腸微生物的影響
Table 4 Effects of antimicrobial peptide and curcumin on caecum microflora of broilers
項(xiàng)目 |
時(shí)間 |
對(duì)照組 |
抗生素組 |
抗菌肽組 |
姜黃素組 |
抗菌肽+姜黃素組 |
Items |
Time |
Control group |
Antibiotic group |
Antimicrobial peptide group |
Curcumin group |
Antimicrobial peptide+ curcumin group |
乳酸桿菌(%) |
21d |
71.93±2.38Aa |
80.23±0.28Bb |
80.24±0.34Bb |
80.32±0.35Bb |
81.79±0.43Bc |
42d |
78.69±0.56Aa |
83.75±1.03Bb |
83.94±0.98Bb |
84.53±0.94BCc |
85.57±0.53Cc | |
雙歧桿菌(%) |
21d |
2.29±0.27Aa |
2.66±0.15Bb |
2.73±0.10Bb |
2.72±0.33Bb |
2.82±0.18Bb |
42d |
2.41±0.10Aa |
3.63±0.28Cc |
3.37±0.15BCbc |
3.26±0.28Bb |
3.37±0.17BCbc | |
大腸桿菌(%) |
21d |
14.94±1.91Bc |
11.02±0.26Ab |
10.78±0.50Ab |
10.08±0.23Aab |
9.56±0.23Aa |
42d |
13.71±0.55Bc |
8.78±0.53Aab |
9.03±0.72Ab |
8.54±0.77Aab |
8.13±0.38Aa | |
沙門氏菌(%) |
21d |
11.01±2.04Bb |
6.10±0.37Aa |
6.22±0.39Aa |
6.88±0.23Aa |
5.86±0.22Aa |
42d |
5.20±0.40Cc |
3.85±0.41Bb |
3.67±0.27Bb |
3.68±0.24Bb |
2.92±0.07Aa |
3 討論
3.1 飼糧中添加姜黃素和抗菌肽對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響
姜黃素和抗菌肽都是具有替代抗生素類藥物的作用,同時(shí)可提高動(dòng)物健康水平和生產(chǎn)性能。劉莉如等[12]研究表明,飼糧中添加350mg/Kg抗菌肽可以顯著提高海蘭褐蛋用仔公雞的生產(chǎn)性能;李婉雁等[13]報(bào)道,在肉雞的基礎(chǔ)飼糧中添加
3.2抗菌肽和姜黃素對(duì)肉仔雞抗氧化功能的影響
動(dòng)物機(jī)體在正常的生理?xiàng)l件下,體內(nèi)自由基的產(chǎn)生與清除處于一種動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài),使機(jī)體免受損傷。隨著機(jī)體的老化或處于應(yīng)激等條件下,機(jī)體產(chǎn)生自由基的量明顯增加,而清除自由基的抗氧化劑的能力卻不斷降低,最終導(dǎo)致體內(nèi)自由基不斷蓄積,與生物膜上的多不飽和脂肪酸發(fā)生氧化或過(guò)氧化反應(yīng);過(guò)量的自由基還可以與蛋白質(zhì)、核酸和膜脂等生物大分子發(fā)生化學(xué)反應(yīng),從而造成細(xì)胞膜、受體、酶及DNA等損傷,最終導(dǎo)致機(jī)體功能下降和代謝紊亂。GSH-Px和SOD是動(dòng)物機(jī)體抗氧化酶體系的重要組成部分,GSH-Px是清除體內(nèi)H2O2和許多有機(jī)氫過(guò)氧化物的重要抗氧化物質(zhì);SOD是廣泛存在于需氧生物細(xì)胞內(nèi)的一種金屬酶,是體內(nèi)超氧陰離子自由基(O2-)的重要清除劑,能催化(O2-)產(chǎn)生歧化反應(yīng)生成氧化活性相對(duì)較弱的H2O2,H2O2雖不是自由基,但易于轉(zhuǎn)變成羥自由基(OH-),對(duì)機(jī)體造成損害。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)鏈?zhǔn)浇K止階段產(chǎn)生的小分子產(chǎn)物,其含量可以間接反映自由基的產(chǎn)生情況和機(jī)體組織細(xì)胞的脂質(zhì)過(guò)氧化程度。這些均是反映機(jī)體脂質(zhì)氧化程度和抗氧化性能的重要指標(biāo),因此測(cè)定抗氧化酶的活性可以間接反映體內(nèi)自由基反應(yīng)的動(dòng)態(tài)變化及組織損傷情況[15]。
抗菌肽和姜黃素可以提高動(dòng)物的抗氧化功能,在飼料中添加已有很多的研究報(bào)道。何義進(jìn)等[16]研究發(fā)現(xiàn)在異育銀鯽飼糧中添加抗菌肽可以顯著提高了血清總抗氧化能力和超氧化物歧化酶的活性,降低了丙二醛濃度,表明抗菌肽可以增強(qiáng)動(dòng)物的抗氧化能力。李婉雁等[13]報(bào)道添加
3.3抗菌肽和姜黃素對(duì)肉仔雞腸道微生物的影響
雛雞在出生時(shí)腸道是無(wú)菌的,進(jìn)食及與外環(huán)境接觸使腸道內(nèi)侵入了各種細(xì)菌,且隨著微生物進(jìn)化過(guò)程形成相互制約、相互依賴的微生態(tài)體系,尤其是畜禽盲腸內(nèi)存在的大量種類繁多的微生物,與畜禽的免疫、營(yíng)養(yǎng)、腫瘤、生物拮抗、急慢性感染等都有著密切的關(guān)系[18-19]。腸道微生物菌群是禽類消化系統(tǒng)的一個(gè)重要組成部分,其組成的變化影響肉雞的免疫反應(yīng)[20],大腸桿菌、沙門氏菌是動(dòng)物腸道的正常菌群,但其中有一些菌株是致病菌,含量過(guò)高時(shí)往往引起動(dòng)物病病。當(dāng)腸道中的大腸桿菌的數(shù)量增加時(shí),其中的致病菌也隨之大幅提高,這樣對(duì)動(dòng)物的健康生長(zhǎng)不利,所以大腸桿菌、沙門氏菌在腸道內(nèi)的數(shù)量直接反映動(dòng)物的健康程度。乳酸桿菌和雙歧桿菌能夠增強(qiáng)動(dòng)物體內(nèi)的免疫力,是動(dòng)物體內(nèi)的有益菌,它們的生長(zhǎng)對(duì)有害菌在空間、營(yíng)養(yǎng)上又有屏蔽競(jìng)爭(zhēng)作用, 同樣抑制有害菌在腸道的定植和生長(zhǎng)。
大量的研究表明抗菌肽和姜黃素均可以抑制有害菌,改善動(dòng)物腸道的微生態(tài)環(huán)境。何義進(jìn)等[16]報(bào)道,抗菌肽主要作用于細(xì)菌的整個(gè)細(xì)胞膜,造成細(xì)胞膜高度透化,抗菌肽穿過(guò)細(xì)胞膜在細(xì)胞內(nèi)積累并干擾胞內(nèi)正常功能,引起細(xì)菌死亡;黎觀紅等[6]報(bào)道,抗菌肽能夠抑制大腸桿菌DNA、RNA和蛋白質(zhì)的合成,從而起到抑制大腸桿菌增殖的作用;Yoon等[21]報(bào)道抗菌肽可以通過(guò)提高有益菌如乳酸菌、雙歧桿菌等微生物的數(shù)量和抑制有害微生物如大腸桿菌群,改善動(dòng)物的腸道平衡,有益于動(dòng)物的健康;Choi等[22]的研究結(jié)果表明,飼糧中添加60 mg/kg抗菌肽可以顯著抑制肉雞腸道中的有害腸道微生物數(shù)量。Peng等[23]研究表明,在羅非魚(yú)上飼糧中添加來(lái)源不同的三種抗菌肽都能降低致病菌的黏附能力,有效地阻止致病菌在腸道上的定植,從而提高機(jī)體的抗病能力;李麗等[24]研究表明在日糧中添加不同水平抗菌肽Abaecin,能夠降低肉雞腸道食糜中的大腸菌群的數(shù)量,而對(duì)有益的乳酸菌菌群數(shù)量有提高趨勢(shì)。韓非非等[25]用化學(xué)合成的方法獲得了豬乳鐵蛋白肽LFP-20及其改良肽,通過(guò)抑菌試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),豬乳鐵蛋白肽LFP-20及其改良肽LF2、ALF-1和LF-3對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌均有抗菌活性。劉莉如等[26]報(bào)道日糧中添加150 mg/kg、200 mg/kg、250 mg/kg、300 mg/kg和350 mg/kg抗菌肽均能有效降低海蘭褐蛋用仔公雞腸道致病菌大腸桿菌數(shù)量,高劑量組能增加腸道益生菌雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量。鄭召嶺[27]、孫全友等[5]報(bào)道黃素素有強(qiáng)烈的廣譜抗真菌作用,對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等有強(qiáng)烈的抑制用,可以改善腸道菌群。鐘英英等[38]通過(guò)抑菌試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)姜黃素可以明顯的抑制沙門氏菌和金黃葡萄球菌。
本試驗(yàn)結(jié)果顯示,肉仔雞飼糧中添加抗菌肽和姜黃素時(shí)可極顯著的增加盲腸內(nèi)乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量,降低大腸桿菌和沙門氏菌有數(shù)量,與以往的研究結(jié)果相一致。其可能原因是姜黃素有較強(qiáng)的抑菌作用,抗菌肽本身是一種陽(yáng)離子小肽,攜帶大量正電荷,而革蘭氏陰性菌的細(xì)胞膜外側(cè)含有大量帶負(fù)電荷的脂多糖(LPS),所以抗菌肽就很容易與革蘭氏陰性菌結(jié)合并形成離子通道,穿透細(xì)胞膜而致死細(xì)菌。此外,抗菌肽還可以作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被動(dòng)物腸道內(nèi)的有益菌消化利用,使有益菌大量增殖,腸道有益菌的增殖可以通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)抑制致病菌的生長(zhǎng),同時(shí)有益菌可產(chǎn)生的乳酸會(huì)降低腸道的pH,從而影響致病菌的定植和繁殖,同時(shí)有益菌還可產(chǎn)生天然的抗生素來(lái)抑制和殺滅病原微生物,使有害菌等病原菌進(jìn)一步減少。
4 小結(jié)
飼糧中添加姜黃素和抗菌肽可以顯著提高肉仔雞的生長(zhǎng)性能和抗氧化功能,顯著增加盲腸內(nèi)乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量,降低大腸桿菌和沙門氏菌有數(shù)量,聯(lián)合添加比單獨(dú)添加效果好,說(shuō)明姜黃素和抗菌肽之間存在一定的互作效應(yīng),可以作為一種新型飼料添加劑組合替代抗生素應(yīng)用于肉仔雞生產(chǎn)中。